一、2019—2021年3年期间收入复合增速40%的上市公司是那

南模生物、药康生物、百奥赛图2019至2021年3年期间业绩复合增速或超40%2021年底以来，南模生物、药康生物、百奥赛图等模式小鼠企业陆续IPO和上市，引起了市场的关注。

二、上海南方模式生物科技有限公司是药企吗

上海南方模式生物科技有限公司是药企。根据查询上海南方模式生物科技有限公司官网显示，上海南方模式生物科技股份有限公司自2000年成立以来，公司在肿瘤、神经退行性疾病、精神疾病、代谢性疾病、炎症、罕见病等基因功能研究和药物研发领域，已累计研发出各类基因修饰动物模型超过10，000种。其中，公司自主研发模型超过5，000种，尤其在PD-1、PD-L1、CTLA-4、CD47、TIGIT等免疫检查点、APOE4型阿尔兹海默症、A/B型血友病等前沿、重点的疾病研究领域，均建立了人源化小鼠及相关疾病模型，得到科研单位和药物研发企业的广泛应用。

三、小鼠取血

尾尖采血

麻醉小鼠后，用温水擦拭尾巴，引起轻微的血管扩张。但水温不要过高。

用无菌手术刀、刀片或锋利的剪刀，快速截断小鼠尾尖0.5-1cm。如果需要多次采血，之后每次仅需截除2-3mm。

可以从尾部向尾尖方向按摩，以增加血流。但是，这会降低血样的质量，增加溶血的风险。

可以用毛细采血管收集血液，或直接滴入收集管中。

采血结束后，按压伤口或使用止血剂（如硝酸银）来止血。

每次采血量大约可达0.1ml。

眼眶静脉丛采血

小鼠经气体麻醉后，左手拇指及食指压迫小鼠的颈部两侧，使眼球突出，眼眶后静脉丛充血。也可以将小鼠放置在侧卧位，拇指与食指分别置于小鼠头顶和下颌，将皮肤向后及向下拉。

抓握时要避免对气管施压，否则可能会影响小鼠呼吸。

将毛细采血管置于内侧眼角处，并且以与鼻翼平面成30-45度刺入。

在轻轻旋转采血管的同时施加压力。血液将通过毛细作用流入采血管。

不能刺地过深，一般2-3mm即可。

采血结束后，立即松开手指对小鼠的压迫，使眼球复位，同时将采血器拔出。

可用干棉球压住眼眶，确保止血。

一般眼眶静脉丛采血量可以达到0.2-0.3ml。

颌下静脉采血

保定小鼠，可将小鼠侧卧，使小鼠头部尽量固定。

在小鼠嘴角沿线与外眼角线橡胶处找到颌下静脉的大致位置，会发现一个无毛的小点，有点像酒窝。基本位于嘴角远端稍低于下巴线。

针保持垂直于皮肤表面，刺入皮肤。深度不超过针头的斜面。

拔出针头后，血液就会流出。为方便采血，可使小鼠头部低于心脏高度。

可以直接使血液滴入采集管，也可以使用毛细采血管。

采血结束后，按压以止血。

一般采血量为0.2-0.5ml。

隐静脉采血

将小鼠置于固定管或架中，但保持后腿可自由活动，剃除跗部的毛。

为使膝盖与踝关节之间的隐静脉更加明显，可以在后腿膝盖以上使用止血带。在近尾侧的皮肤表面可以找到隐静脉。

针垂直于皮肤表面扎破血管。不要进针过深，以免刺穿肌肉或碰到骨头。

血液会从入针处慢慢流出，用毛细采血管收集，并松开止血带。

采血结束后，按压伤口或使用止血剂（如硝酸银）以止血，并将小鼠放回笼内。

心脏采血

一般有3种心脏采血的姿势：

1、托起小鼠躯干使身体垂直与地面。身体直立以防止心脏的偏转或胸部的扭曲。使用1毫升注射器和22g针头。将针头从胸部中央向下5mm处插入，深度5-10mm，将注射器与胸部保持25-30度。

2、使小鼠仰卧，通过胸骨垂直插入针头。

3、使小鼠侧卧，垂直于胸壁插入针头。

如果血液没有立刻进入注射器，可以轻轻抽空针管，产生一个真空区。

当注射器中出现血液时，将针管保持静止并轻轻地抽拉活塞芯杆，以获得更多地血液。

一般可以采到0.8-1.0ml血液。

南模生物可提供 小鼠血液分析服务 ，或者直接与我们的应用技术顾问联系，咨询更多服务细节

参考文献

1、Diehl K. H, et al. A good practice guide to the administration of substances and removal of blood, including routes and volumes. J.Appl.Toxicol.21,15-23. (2001).

2、Joslin O.T,et al. Blood collection techniques in exotic small animals. Journal of Exotic Pet Medicine. 18:2. 117-139.(2009)

3、Janet H, et al. Methods of Blood Collection in the Mouse.Lab Animal.29 (10):47-53.(2010).

4、Guidelines for the survival bleeding of mice and rats. （2000）.

5、Hem A., et al. Saphenous vein puncture for blood sampling of the mouse, rat, hamster, gerbil, guinea pig, ferret and mink. Laboratory Animals. 32. 364-368. (1998)

四、基因工程小鼠的命名规则

最近，读了几篇肿瘤转移相关文献，出现了各种基因修饰小鼠的名字。

看着一堆眼花缭乱的编号，还带着各种上标和符号。很多不太好理解。

所以，专门查了一下命名规则及具体说明。

这里就搬运一下，“男模生物”

里面介绍了各种小鼠的命名规则，以及很多公司已经有的小鼠。

【小鼠大学问】基因工程小鼠的命名规则|南模生物 (modelorg.com)

看的时候里面有些不理解。

所以再加一些备注。

什么是Cre工具鼠？

由转基因或基因敲入手段建立，将Cre重组酶整合到小鼠基因组中，可以特异识别重组酶识别位点（例如：LoxP位点），从而使我们需要的flox小鼠发生时空特异性敲除或敲入的小鼠就是我们的Cre工具鼠。

什么是LoxP位点： Cre-loxP 基因重组技术 - 实验方法 - 丁香通 (biomart.cn)

这里有解释。

为什么要用到Cre工具鼠

CKO（Conditional Knock Out）小鼠相对于KO（Knock Out）小鼠来说有以下几点优势：

1.可以用于具有胚胎致死性目的基因的研究；

2.可以用于研究基因在特定的组织或细胞中的生理病理功能；

3.通过与控制Cre或Flp表达的其它诱导系统相结合，还可以对某一基因的表达同时实现在时间和空间两方面的调控。为了实现各位研究者对于基因的条件性表达，将我们的CKO小鼠与Cre工具鼠交配后即可实现这一目的。

什么是Flox小鼠？

定义：条件性基因敲除小鼠（也叫Flox小鼠）是指在目的基因中含有成对的loxp位点的小鼠，与Cre工具小鼠交配后可在特定的组织或细胞中敲除目的基因。

集合这些资料：基本上了解个七七八八。

具体细节再自行百度。

有的时候我们除了关心一个基因的功能外，还想知道表达目的基因的这类细胞在体内是什么作用。

那么怎样才能在体内把一群细胞剔除掉呢？

这时候 [DTR]小鼠就能大展身手啦。

DTR 小鼠是通过基因编辑让目的细胞表达白喉毒素受体（Diphtheria toxin receptor，简称DTR），然后通过注射白喉毒素（Diphtheriatoxin，简称DT）实现细胞的条件性剔除。

sgRNA是什么？

sgRNA（small guide RNA）是向导RNA（guide RNA，gRNA），在RNA编辑的过程中引导尿苷残基插入或缺失到动质体（kinetoplastid）中，属于一种小型非编码RNA，可与[pre-mRNA]配对。gRNA编辑RNA分子，长度大约60-80个[核苷酸]，由单独的基因转录。

sgRNA 是大名鼎鼎的基因编辑神器 Cas9 系统的“指挥中心”，可以引导 Cas9 对 DNA 进行定点编辑。

五、求助基因敲除小鼠大概多少钱一只？

医学生、生化专业的学生或许想不到，有一天他们在实验室解剖的小白鼠，也能成为拟上市公司的主营业务。

科创板官网显示，江苏集萃药康生物科技股份有限公司（以下简称“集萃药康”或“公司”）已于日前过会，而上一个以包括小白鼠在内的实验动物为主营业务的科创板公司南模生物，已于11月初注册生效。

根据Frost & Sullivan统计，2019年中国实验小鼠产品和服务市场规模为28亿元。相比其他动辄百亿起步的赛道，这么小的一个细分市场，竟然能跑出两家拟上市公司？

一只耗子一万块钱？

根据招股书，2018年至2020年，集萃药康分别录得营收5329.06万元、1.93亿元与2.62亿元，同期扣除非经常损益后归属于母公司的净利润分别为1039.67万元、3372.52万元与6646.04万元。而同时期南模生物营收分别为1.21亿元、1.55亿元与1.96亿元，扣非归母净利润分别为329.04万元、1240.46万元与3275.55万元。

从主营业务构成来看，集萃药康专注于实验小鼠模型，而南模生物涉及的实验动物包括小鼠、大鼠、斑马鱼、线虫等，不过其营收贡献比例较高的基因修饰动物模型主要为小鼠模型。集萃药康主营业务中营收占比过半的是“商品化小鼠模型销售”，包括斑点鼠、免疫缺陷小鼠模型、人源化小鼠模型、疾病小鼠模型与基础品系小鼠，最贵的“斑点鼠”2020年销售单价为11723.99元/只，最便宜的基础品系小鼠也要62.91元/只，而南模生物并未披露小鼠模型的销量与单价。

集萃药康主营业务收入构成 图源：招股书

“斑点鼠”是啥？根据集萃药康招股书，“斑点鼠”其实是基因敲除小鼠，公司于2019年起大规模开展“斑点鼠计划”，旨在预先构建小鼠所有（2万余个）蛋白编码基因的小鼠品系库，目前已经实现了基因敲除小鼠的产品化供应，将原来的客户定制交付周期由4~7个月缩短至最少7天。截至2021年6月30日，公司“斑点鼠计划”资源库已拥有约1.9万个品系，涵盖了肿瘤、代谢、免疫、发育、DNA及蛋白修饰等研究方向的基因。

从公司技术实力来看，集萃药康拥有数量更为庞大的小鼠品系资源，而南模生物的人源化小鼠模型具备一定优势。集萃药康拥有约2万个小鼠模型品系，领先于同行业可比公司，包括南模生物的6017个；而南模生物表示，针对CRO公司、医药公司等开展药效研究及评价的人源化小鼠模型方面，南模生物拥有285种人源化基因修饰模型品系，而集萃药康拥有69个。

同行业可比公司小鼠模型品系数量 图源：招股书

超过70%的毛利率？

从毛利率来看，尽管业务模式和主营产品类似，但集萃药康的毛利率远高于南模生物。2018年至2020年，集萃药康主营业务毛利率分别为68.24%、68.95%与76.21%，同期南模生物仅为44.32%、50.55%与60.34%，而集萃药康的“斑点鼠”业务毛利率更是高达95%。

在对监管问询的回复中，集萃药康表示，公司将繁殖鼠与库存鼠分别计入生产性生物资产和消耗性生物资产，将相关支出计入管理费用，并将消耗性生物减值计入资产减值损失，并未归集至营业成本；而南模生物不存在生产性生物资产与消耗性生物资产，小鼠相关的饲养繁育成本均归集至营业成本核算。并且，比起位于上海的南模生物，集萃药康主要经营场所位于南京和常州，区位人力成本相对较低，2020年公司生产人员平均薪酬为9.39万元，而南模生物为15.88万元。

而监管在问询中也提到，集萃药康研发费用中材料支出较大，如何区分研发领料和生产成本？根据招股书，2018年至2020年，集萃药康研发费用中的材料费用分别为83.55万元、976.22万元与1195.23万元，占研发费用比例为7.95%、32.21%与24.79%；而生产成本中“直接材料”一项同时期分别为777.79万元、1668.86万元与1446.92万元。公司回复称，研发部门直接领料按金额计入研发费用，而研发部门委托生产部门完成部分工作时，按照使用情况按月在生产成本与研发费用之间分摊；公司列出的研发费用材料支出明细则显示，占大头的是实验器材，2018年至2020年实验器材费用分别为44.00万元、728.23万元和941.58万元，占材料支出比例分别为52.66%、74.60%与78.78%，包括DNA提取试剂盒、糖化血红蛋白检测试剂盒等。

集萃药康研发费用中材料支出明细 图源：问询函回复

“确实可能会有企业试图把生产成本转移到研发费用上，一个是毛利率会显得高，再一个科创板有研发费用占营收比例的红线，同时研发费用也有加计扣除的政策。”某投行人士对银柿财经记者表示，“但具体案例还需要具体分析，没有底稿和原始凭证也是比较难判断的。”

2018年至2020年，集萃药康剔除股权激励成本后的研发费用率分别为19.73%、15.72%与16.33%，同期南模生物为14.49%、18.53%与17.54%。

六、生物工程里的小鼠

转基因小鼠一般用作基因的过表达研究，根据制备策略不同，分为随机转基因和定点转基因。随机转基因是将过表达载体注射到受精卵中，表达载体以随机方式插入基因组，首建鼠整合位点不确定，拷贝数随机，可能导致有的发生表达沉默，因此需要使用不同首建鼠分别传代，进行建系，最终筛出可以稳定表达的品系用于后续实验。定点转基因是将基因表达载体插入到基因组特定位点，如Rosa26或H11位点，该类位置是转录活跃区域，且不会破坏小鼠内源基因，与随机转基因相比，优势是遗传特性稳定，表达确定。

传统策略是通过同源重组的方式，用Neo基因替换关键外显子实现敲除目的基因，其周期长，费用高。CRISPR/Cas9技术出现后，加速了基因敲除鼠的制备，并且降低了成本，只要在关键外显子两端设计两条gRNA，就可以直接删除关键外显子，使基因发生移码突变，进而造成基因敲除的效果。

当目的基因敲除致死时，只能选择条件性基因敲除，需要使用Cre-loxp系统。常规做法是在要敲除的区域两侧插入loxp位点，进而得到floxed （flanked by loxp sites）小鼠，而后再与组织特异或诱导型Cre阳性小鼠交配，在Cre酶的作用下，两个loxp之间的关键外显子被删除，造成基因移码突变，可以实现在特异的组织中敲除目的基因。

某些临床疾病是因为基因编码区的非同义单碱基突变引起，这时可以在小鼠的同源基因相应位点进行模拟。CRISPR/Cas9系统切割基因组目的位点的同时，提供含有目的突变的单链修复模板，则能够有效地建立点突变小鼠。

CRISPR/Cas9系统切割目的基因的同时，提供外源DNA载体，能够在目的基因位点敲入其他外源基因或元件，如南模生物自研的免疫检查点PD1，PDL1，CTLA4等人源化小鼠，都是通过CRISPR/Cas9技术，将小鼠基因替换成人源基因。为实现基因表达示踪，对各类荧光蛋白、荧光素酶及蛋白标签等元件的插入也可以用CRISPR/Cas9技术来实现。

好的研究往往会使用到不同类型的【基因修饰小鼠】，同时会构建多个品系（CNS文章动辄就会使用到十几个到几十个品系），因此对众多品系的繁育问题就成为一个大工程。更令人头疼的是不同类型的【基因修饰小鼠】往往需要用到不同的繁育策略，在最大限度节约时间及金钱成本的同时，如何快速繁育出符合数量及质量双重实验要求的小鼠，已经成为一门大学问。

以条件性敲除小鼠繁育为例，其中涉及到多种基因型的小鼠，哪些小鼠是基础鼠，哪些是中间鼠，哪些是目标鼠，其中目标鼠中哪些是实验组鼠，而哪些又是对照组鼠呢？